(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利说明书 | ||
(10)申请公布号 CN 104585034 A (43)申请公布日 2015.05.06 | ||
(21)申请号 CN201510027256.6
(22)申请日 2015.01.20
(71)申请人 广东省农业科学院环境园艺研究所
地址 510640 广东省广州市天河区金颖东一街1号
(72)发明人 于波 朱根发 孙映波 黄丽丽
(74)专利代理机构 广州粤高专利商标代理有限公司
代理人 陈卫
(51)Int.CI
A01H4/00
权利要求说明书 说明书 幅图 |
(54)发明名称
一种朱顶红花瓣组织诱导再生植株的方法 | |
(57)摘要
本发明属于植物诱导再生技术领域，具体公开了一种朱顶红花瓣组织诱导再生植株的方法。本发明将朱顶红花瓣垂直于花蕾纵轴进行横切，切成宽度≤1.0mm的环状花瓣细丝，作为外植体；将外植体置于诱导培养基上，在24~26℃，黑暗条件下培养，花瓣的外表面产生突状物；再将产生突状物的外植体转移至再生培养基上，在24~26℃，每日12~14h光照环境下培养，突状物形成不定芽继而形成完整植株。本发明采用朱顶红环状花瓣细丝作为外植体，建立了高效的器官发生途径的植株再生体系，其突状物诱导率最高达100%，不定芽诱导率最高达100%，植株再生率最高达98%，平均每个外植体最多可产生12.8棵小植株，植株的再生效率明显提高。 | |
法律状态
法律状态公告日 | 法律状态信息 | 法律状态 |
2022-07-05 | 专利权的转移IPC(主分类):A01H 4/00专利号:ZL2015100272566登记生效日:20220622变更事项:专利权人变更前权利人:广东省农业科学院环境园艺研究所变更后权利人:中山市西江花木研究有限公司变更事项:地址变更前权利人:510640 广东省广州市天河区金颖东一街1号变更后权利人:528478 广东省中山市横栏镇三沙村接源路20号首层之六 | 专利申请权、专利权的转移 |
权 利 要 求 说 明 书
1.一种朱顶红花瓣组织诱导再生植株的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1. 外植体处理：取朱顶红幼嫩花序，经表面消毒后，切除外苞片，取出花蕾，将花瓣垂直于花蕾纵轴进行横切，切成宽度≤1.0mm的环状花瓣细丝，将花瓣细丝作为外植体；
S2. 突状物诱导：将处理好的外植体水平放置于诱导培养基上，在24~26℃，黑暗条件下培养，花瓣的外表面产生突状物；
S3. 植株再生：将产生突状物的外植体转移至再生培养基上，在24~26℃，每日12~14h光照环境下培养，突状物形成不定芽继而形成完整植株。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，S1所述花瓣被切成宽度为0.8~1.0mm的环状细丝。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，S3所述光照的强度为1000~1400 lux。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，S2所述诱导培养基以MS培养基为基本培养基，
并添加0.1~1.0mg/L 噻苯隆、0.1~3.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、20~40g/L 蔗糖，pH5.8~6.0。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述噻苯隆的添加量为0.5 mg/L，所述2,4-二氯苯氧乙酸的添加量为0.1~1.0 mg/L。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，S3所述再生培养基以MS培养基为基本培养基，并添加0~1.0mg/L 6-苄基氨基腺嘌呤、20~40g/L 蔗糖，pH5.8~6.0。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述6-苄基氨基腺嘌呤的添加量为0~0.5 mg/L。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，S1所述消毒的方法为用70%乙醇浸泡15min后，用无菌水清洗3次。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，S2所述培养的时间为8~12周，S3所述培养的时间为4~8周。
10.根据权利要求1~9任一项所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1. 外植体处理：取朱顶红幼嫩花序，70%乙醇浸泡15min后，用无菌水清洗3次，切除外苞片，取出花蕾，将花瓣垂直于花蕾纵轴进行横切，切成宽度为0.8~1.0mm的环状花瓣细丝，将花瓣细丝作为外植体；
S2. 突状物诱导：将处理好的外植体水平放置于诱导培养基上，在24~26℃，黑暗条件下培养8~12周，花瓣的外表面产生突状物；
S3. 植株再生：将产生突状物的外植体转移至再生培养基上，在24~26℃，每日12~14h光照、光照强度为1000~1400lux的环境下培养4~8周，突状物形成不定芽继而形成完整植株；
S2所述诱导培养基为以MS培养基为基本培养基，添加0.5mg/L 噻苯隆、0.1~1.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、20~40g/L 蔗糖，pH 5.8~6.0；
黑暗组织 S3所述再生培养基为以MS培养基为基本培养基，添加0.5 mg/L 6-苄基氨基腺嘌呤，20~40g/L 蔗糖，pH 5.8~6.0。
说 明 书
<p>技术领域
本发明属于植物诱导再生技术领域，具体涉及一种朱顶红花瓣组织诱导再生植株的方法。
背景技术
朱顶红（<i>Hippeastrum hybridum</i> Hort.）又名朱顶兰、孤挺花、华胄兰等，为石蒜科朱顶红属重要多年生的草本植物，原产热带美洲，是世界著名的球根花卉。
朱顶红的组织培养研究始于20世纪70年代，目前，多采用鳞茎或鳞茎盘、子房或花梗（包括幼嫩蒴果、幼嫩花茎和幼胚）和下胚轴为起始材料，经诱导培养获得愈伤组织、不定芽或体细胞胚，然后培养获得完整植株。当使用鳞茎或鳞茎盘作为外植体时，需要挖取种球，会对种球造成破坏，特别是在育种早期阶段，对原始母球造成破坏；当使用花梗或子房作为外植体时，由于花梗或子房的数量有限，难以用于植株的大量繁殖。上述途径存在愈伤组织诱导周期较长、无菌苗易发生退化与变异，朱顶红的繁殖再生率低等缺点。
版权声明：本站内容均来自互联网，仅供演示用，请勿用于商业和其他非法用途。如果侵犯了您的权益请与我们联系QQ:729038198，我们将在24小时内删除。
发表评论