骨髓细胞糖原染(PAS)的标准操作程序
骨髓细胞糖原染（PAS）的标准操作程序
【目的】保证骨髓细胞糖原染结果的准确性。
【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报请专业组长及科主任签字后生效。
【方法原理】骨髓细胞化学染是以细胞形态学为基础，运用化学反应的原理对血细胞内的蛋白质、核酸、酶类、糖类、脂类及无机盐类进行定性、定位、半定量分析的方法。主要用于辅助诊断急性白血病类型；协助血液系统等疾病的诊断、鉴别诊断；观察疾病的疗效和预后；探讨发病机制等。
失眠的好方法糖原染的原理细胞内含有乙二醇基的多糖类物质被过碘酸氧化形生双醛基类物质，后者在醛基与无品红（Schiff试剂）结合产生紫红化合物，定位于含多糖类成分的细胞质中，沉淀物的显深浅与乙二醇的含量成正比。【试剂】糖原（PAS）染液，贝索生物技术有限公司
1、PAS Ⅰ液：2.5ml×5。
2、PAS Ⅱ液：2.5ml×5。
3、PAS Ⅲ液：2.5ml×5。
4、20g/L甲基绿溶液或苏木素液秦国国君
【操作】
1、涂片滴加PAS Ⅰ液5分钟，水洗，晾干。
2、滴加PAS Ⅱ液10分钟，水洗，晾干。
3、置于PAS Ⅲ液中暗处放置30分钟，流水冲洗5分钟，晾干。
4、20g/L甲基绿溶液或苏木素液复染5分钟，水洗晾干，镜检。
【结果判断】
阴性：细胞内无红沉淀
阳性：细胞内出现红沉淀物，定位于胞质。蝇蛆养殖
细胞质出现红颗粒、块状或弥漫状红为阳性阳性强度参考标准
－细胞质无，无颗粒
＋细胞质淡红，或少量红颗粒；
2＋细胞质红，或10个以上红颗粒；
3＋细胞质红，或有粗大颗粒，可出现红块状；
4＋细胞质紫红或有粗大块状。
一般原粒细胞呈阴性反应，早幼粒细胞以下随着细胞成熟而阳性增强，成熟中性粒细胞最强；嗜酸性粒细胞颗粒不着，细胞质为阳性，嗜碱性粒细胞阳性。原淋巴细胞阳性程度低，随着细胞成熟阳性程度稍增加。单核细胞仅有少量、细小颗粒。幼红细胞为阴性。巨核细胞和血小板为阳性。
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1、幼红细胞PAS染强阳性除见于红血病及红白血病外，也可见于部分严重缺铁性贫血、重型地中海贫血及一些铁粒幼细胞性贫血，若能排除3种贫血，有助于红血病、红白血病诊断。溶血性贫血有的为弱阳性，巨幼细胞性贫血和再生障碍性贫血与红白血病的鉴别。
2、急性粒细胞白血病的原粒细胞PAS染阴性或弥漫淡红阳性；急性淋巴细胞白血病的原、幼淋巴细胞为红颗粒状或块状阳性，少数为阴性反应；急性单核细胞白血病的原、幼单核细胞为红细颗
粒、胞质边缘及伪足处颗粒明显，分化差的原单核细胞为阴性；急性巨核细胞白血病的原巨核细胞为红颗粒、块状阳性或强阳性。
3、戈谢细胞与尼曼-匹克细胞鉴别前者强阳性，后者阴性或弱阳性。
4、淋巴肉瘤细胞与Reed-Sternberg细胞鉴别前者阳性，后者为阴性或弱阳性。【注意事项】
1、过碘酸的质量要保证，氧化时间应严格掌握。
2、滴加Ⅱ液后水洗应充分，然后待涂片完全干燥后才能置入Ⅲ液内。
3、Schiff试剂应避光保存，若溶液变红，则弃去不用。
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4、所用染缸及器皿宜清洁干燥。辟邪图片
5、染好的涂片不宜久置，放久逐渐褪。

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