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结核分枝杆菌GeneXpert核酸扩增检测操作步骤(总4页)
结核分枝杆菌GeneXpert核酸扩增检测操作步骤
一、准备工作：
1. 开机
糟鱼怎么做① 依次开启：UBS电源、仪器电源、打印机电源、笔记本电脑电源；
② 等待笔记本电脑进入系统，出现四个用户图案时，选择用户Cepheid，输入密码：cphd ，等待约一分钟后系统弹出登录窗口，依次输入用户名和密码；
③等待Gene-Xpert操作软件的启动与自检过程，自检过程中软件出现“数据库管理”提示窗，点选“否”；再在“存档”提示窗点选“否”，待模块进展显示“可用”。
④仪器预热15分钟后再进行检测。
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2. 耗材准备
①标本处理液、 ②Cartridge反应盒、 ③前处理管（带有盖子的试管）、
④塑料滴管（每个标本准备2支）、 ⑤待检标本。
3. 样品预处理
①前处理管标号或粘贴条形码，再吸取2ml标本处理液在前处理管中，加入1ml标本；
②旋紧盖子，旋涡仪振荡10秒或剧烈摇动10-20次，室温静置10分钟，再旋涡仪振荡10秒或剧烈摇动10-20次，室温静置5分钟，观察无可见块状痰标本存在。
4. 试剂盒
①拆开Cartridge反应盒包装，小心取出，不要接触到正面的二维码、上面胶盖和后面有尖端区域，避免污染，可在侧面编号或粘贴条码。
②小心上拔开启Cartridge反应盒蓝上盖的前部，取处理后的样品2ml，沿样品加入口的
内壁缓缓加入反应盒内（避免吸到未液化的粘液部分，吸液量可以略超过两毫升，把尖端残液保留不注入，以免产生气泡）。
二、测定操作：
1 .在GeneXpert Dx系统窗口的工具栏点击『创建测试』；
2. 在“扫描患者ID条形码”弹窗，选“手动输入患者条形码”，再输入患者的姓名；
3. 在“扫描样品ID条形码”弹窗选“手动输入”，再在弹窗内输入痰检的实验室编号；
4. 在“扫描检测盒条形码”弹窗内，用扫码方法（或手动）输入测试盒上的条码，成功后软件自动指定待运行板块（(注意：为了保障每个模块有均等的运行机会，软件会选择运行次数最少的模块；但手工可以选择不同的模块）。此时板块顶部绿指示灯亮起并开始闪烁，点击“开始测试”。
⑤打开指定的测定板块（顶部指示灯闪动），将Cartridge反应盒放入其中，关紧板块前门，检测开始，系统内有测定完成时间倒计时显示，等待检测结束（时间约2h）。
三、打印报告
1. 在系统窗口的工具栏点击“查看结果”，点击页面下端的“报告”，在对话框中勾选需要打印的结果，点击“生成报告文件”，点“保存”；
2. 确认打印机有纸，点“预览PFD”，再选弹出报告，点“打印”，弹出窗再选“当前页”，点OK之后打印出报告单。
四、关机
1. 取出检测完成的Cartridge反应盒
2. 退出笔记本电脑系统，选择关机按钮，关闭电脑；
3. 依次关断：检测设备电源、打印机电源；
4. 按下UPS电源OFF开关，等待电源输出关闭，之后关闭排插上的电源开关。
五、质量控制措施
（一）样本与保存：
1.每份样品需收集痰液至少 1 mL 痰液，不应使用含明显的食物颗粒的样本和血痰。
2.标本保存：
①原始痰标本或已处理过（去污染/浓缩）的痰标本： 2–8°C冷藏, 最长保存10天；
②在必要的情况下，标本可在室温下（环境温度最高为35°C）最长保存3天，然后再置于2–8°C进行冷藏，前后累计天数最长仍为10天。
3.已加入样品处理剂的标本保存：
①原始痰标本或已处理过（去污染/浓缩）的痰标本： 如果可在2-8°C冷藏， 12小时内完成处理；如果不具备该冷藏条件，需在5小时内完成处理；
②已加人样品的试剂盒的保存（如：遭遇突然停电）： 从加入样品后至测试开始时间在4小时之内，试剂盒可以直接上机测试； 如果超过4个小时，则需要换一个新的试剂盒重新加样再测试。
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（二）试剂盒与加样
1.试剂盒保存于 2-28° C，干燥环境中，避免阳光直射。
2.开启后，始终保持试剂盒处于直立状态，避免震动、倾斜或坠落！用手取试剂盒时，仅能接触试剂盒的左右两侧，不能接触盒盖、前面的二维码，或者后面的反应管。
• 不要在盒盖上进行标记或者妨碍识别试剂盒已有的二维码
• 可以在试剂盒的左右两侧手写标记样品编号或粘贴样品编号标签
3.用移液管吸取过程中需小心操作，避免产生气溶胶和气泡，不要把制备样品中的固体颗粒加入到试剂盒里，在试剂盒操作说明建议的15分钟（10+5）处理步骤后，如果样本仍然很粘稠，那么不要直接加入试剂匣，建议额外等待10分钟直至样本完全液化，然后再使用一支新的移液管取样至试剂匣。样本的总体积需要在2-4毫升之间。
4.如果发生以下情况，试剂盒不可使用：
①检测日期超过试剂盒标注的有效期；②外部潮湿；
撩女朋友的情话③盖子有破损或者 (意外) 开启； ④加入处理的样品之后，试剂盒坠落或震荡；
⑤位于试剂盒后面的PCR反应管破损；⑥已使用过的试剂盒，扫描之后不能重复使用；
⑦试剂盒的包装（指10只试剂盒的袋装）打开长达6周以上。
（三）实验室环境：
缝肛门事件温度保持在 15-25℃，并确保机器处于干燥的环境中，避免阳光直射，避免灰尘。
（四）GeneXpert 仪器维护指引
项目 | 方法 | 维护频率 |
清洁机器表面 | 酒精擦拭 | 每月一次 |
清洁试剂盒仓室 | 酒精擦拭（注意：不要清洁I-CORE反应管插缝！） | 每月一次 |
清洁柱塞杆 | 酒精擦拭 | 每月一次 |
清洁风扇处空气过滤片 | 取下过滤片，吹掉灰尘 | 每月一次 |
更换风扇处空气过滤片 | 更换新的空气过滤片 | 每年或定期更换（必要时） |
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