2020年及以前北京市、广东省、安徽省PCR上岗证考试试题汇总 （答案及解析）
1、某个婴儿不能消化乳糖，经检查发现，他的乳糖酶分子有一个氨基酸改换而导致乳糖酶失活，发生这种现象的根本原因是（ C ）
A. 缺乏吸收某种氨基酸的能力 B. 不能摄取足够的乳糖酶
C. 乳糖酶基因个别碱基发生改变 D. 乳糖酶基因有一个碱基缺失了
分析：由题意知，与正常婴儿相比，的乳糖酶不能消化乳糖的婴儿分子有一个氨基酸发生了替换，该婴儿的乳糖酶基因发生了突变，如果是由基因中碱基对的增添或缺失引起，则乳糖酶中可能会有多个氨基酸发生变化，因此发生这种现象的根本原因是乳糖酶基因个别碱基发生了替换．故选：C．
2、如果将镰刀型细胞贫血症的患者血液输给一血型相同的正常人，将使该正常人（ B ）
A基因产生突变，使此人患病 B无基因突变，性状不遗传给此人
C基因重组，将病遗传给此人 D无基因重组，此人无病，其后代患病
3、传统的Sanger测序技术一次测序长度能够达到：（ ）
A、100-300bp B、300-500bp C、600-900 D、＞1Kb
4、双脱氧末端终止法测序体系与PCR反应体系的主要区别是前者含有（D）
A．模板 B．引物 C．DNA聚合酶 D．ddNTP E．缓冲液
5、分子杂交试验不能用于（D）
A．单链DNA分子之间的杂交 B．单链DNA分子与RNA分子之间的杂交
C．抗原与抗体分子之间的结合 D．双链DNA分子与RNA分子之间的杂交
6、在Sanger基因测序技术中心所使用的酶是：（ A ）
A．DNA聚合酶 B．RNA聚合酶 C．DNA连接酶 D．DNA拓扑酶
7、下列表观遗传学变异哪项能够通过基因测序检测：（B）
A．DNA聚合酶 B．组蛋白甲基化 C．端粒酶活性 D．组蛋白乙酰化
8、基因突变是指DNA分子中发生碱基对的（缺失）（替换）（异位）而引起的基因突变。
9、DNA双链中，碱基对 A-T/G-C配伍，A-T以3个氢键，G-C以2个氢键相连。（×）
10、使用有防“污染”作用的尿苷糖基酶（UNG）的PCR试剂盒，该酶可以降解（√）
11、样本核酸定性检测的室内质控应选择阴性，阳性和弱阳性质控，室内质控应该包括样本提取和检测的全过程。（√）
12、定量PCR与定性PCR测定原理的最主要区别点在于前者的测定点在PCR的指数扩增期而后者多为扩增平台期（√）
13、室内质量控制（IQC）监测和控制的是实验室测定的精密度（重复性），而室间质量评价则通过不同的实验室测定结果的比对而评价实验室测定的准确度。（√）
14、临床检验中的系统误差通常表现为质控物测定SD的增大。（×）应该为随即误差依据质控物测定的SD的增大
15、以下哪项有利于DNA保存（A）
A．加入EDTA螯合钙离子，去除核酸酶的活性
B．加入少量的DNAse
C．溶于PH3.0溶液
D．加入少量的RNAse
16、在开展临床检验项目时，应首先考虑：（A）
A．临床有效性和分析有效性 B．检测精密度和检测准确度
C．临床有效性和检测精密度 D．分析有效性和检测准确度
17、荧光定量PCR检测过程中，基线漂移的可能原因有：（D）
A．蒸发 B．探针水解 C．相邻荧光通道干扰 D．以上都是
18、将基因扩增实验室的产物分析去设置为负压状态，目的是：（C）
A．防止该区灰尘的逸出 B．为了生物安全的目的
C．防止扩增产物从该区逸出 D．防止有生物传染危险的样本逸出
19、真核生物DNA主要以那种形式存在：（D）
A．环状单链分子 B．线性单链分子
C．环状双链分子 D．线性双链分子 E 线性或环状双链分子
20、每次PCR试验必须做阴性对照，阴性对照应至少包括：
A、空白试剂对照 B、未加模板的扩增区反应混合液
C、阴性样本 D、双蒸水
21、实验室清洁工作应在以下情况下进行：（D）
A、每次试验后 B、文件规定清洁时间
C、实验室发生污染时 D、以上都是
22、核酸提取步骤可能出现的问题：（D）
A、模板中的蛋白质、脂类、糖类未去除 B、 提取过程中引入的有机溶剂未去除。
C、由于人员操作和设备状态不好造成提取效率低 D、以上都是
23、DAN是反向平行的互补双链，一条链从上往下走向都是5‘→3‘，另一条是从下往上也是’ 5‘→3‘（√）
24、DNA复制和转录过程的新链合成方向都是5‘→3‘。（√）
25、无室间质评计划可参加时，可以用室内质控替代。（×）
26、肿瘤基因检测既可以使用患者的肿瘤样本，也可以直接使用血液样本。（√）
27、即使核酸检测有纯化的步骤，也不可以使用检验科检测其他项目后剩余的血液样本进行核酸纯化和检测。（√）
28、扩增管没有盖好会造成PCR反应液热蒸发，直接影响结果，同时可称为一个污染源。（√）
29、核酸提取时，常需使用氯化钠或醋酸钠等盐溶液，其目的是：（A）
A、中和核酸的负离子 B、条件PH
C、由于人员操作和设备状态不好造成提取效率低 D、以上都是
北京市A 卷 2018年第二期临床基因扩增检验实验室规范化培训班理论考试
一.填空（每空0.5分，共15分）
1. 为加强医疗机构临床基因扩增实验室规范化管理，卫生部于2010年发布《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》，北京市卫生局为做好实验室备案工作，于2012年发布了《北京市医疗机构临床基因扩增检验实验室技术审核暂行规定》。
2. 申请设置临床PCR检测实验室应当进行备案，提供的材料包括：《医疗机构执业许可证》、拟设置基因扩增检验实验室的医疗机构对临床基因扩增检验的需求情况拟设基因扩增检验实验室的设置平面图；实验室负责人简历表；实验室工作人员一览表；主要仪器设备一览表、 拟开展的临床基因扩增检验项目、 实验室质量管理程序文件和作业指导书目录、检验报告样单、 北京市医疗机构临床基因扩增检验实验室自查/审核表和其他相关材料。医疗机构医学检验科应当设有 细胞分子遗传学专业诊疗科目。
3. 室内质量控制（IQC）监测和控制的是实验室测定的精密度 ，而室间质量评价则通过对不同的实验室测定结果的比对而评价实验室测定的准确度。
4. 1977年，Sanger等发明的 和Gilbert等发明的 末端合成终止法 (sanger法)
标志着第一代测序技术的诞生。
5. 核酸包括两种类型：脱氧核糖核酸和 核糖核酸，二者的主要区别为：前者由ATGC四种碱基组成，而后者由AUGC四种碱基组成。
6. 根据遗传中心法则，遗传信息的流动方向为 DNA；RNA；蛋白质。
1，7. 普通临床基因扩增检验实验室一般包括下面四个分区：试剂储存和准备区；标本制备区；扩增区；扩增产物分析区。
2，8. 提纯的核酸样品可根据A260nm波长的光吸收值算出其含量，通过计算A260nm/A280m波长光吸收比值计算出其纯度。
9. 基因扩增实验室负责人应具有相关专业 专业技术职称任职资格，技术负责人应具有相关专业 （高级）学位，并有5年以上相关专业的工作经历。上岗证在哪办
10. cfDNA的中文名称是游离脱氧核糖核酸，ctDNA的中文名称是循环脱氧核糖核酸。
二．是非题（在你认为正确的句子后面打√，错误的后面打×，每题1分，共15分）
1. DNA双链中，碱基A-T之间以三个氢键相连，G-C以两个氢键相连。 （ ×）
2. 使用有防“污染”作用的尿苷糖基酶（UNG）的PCR试剂盒，该酶可以降解含有UTP的扩增产物。 （√）
3. DNA变性是指在物理或化学因素的作用下，导致两条DNA链之间的氢键断裂，而核酸分子中的所有共价键同时也受影响。 （×）
4. 自制室内质控品时，应对质控品的均匀性和稳定性进行评价。 （√）
5. 定量PCR与定性PCR测定原理的最主要的区别点在于前者的测定点在PCR的指数扩增期，而后者多为扩增平台期。 （√）
6. 处理PCR标本时，在没有生物安全柜的情况下，可用超净台操作。 （×）
7. 临床检验中的系统误差通常表现为质控物测定结果的SD增大。 （×）
8. 生物安全2级实验室（BSL-2）的实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。 （√）
9. DNA复制和转录过程的新链合成方向都是5′→3′。 （√）
10. 质量体系文件中应包括质量方针、质量目标和质量指标。 （√）
11. 无法参加室间质量评价计划时，可以用室内质控替代。 （×）
12. 一般进行HCV-RNA 检测时宜采用EDTA抗凝血，不宜采用肝素抗凝。 （√）
13. 以次氯酸为主要成分的清洁剂在配制后可以长期使用。 （×）
14. 核酸的解链温度（Tm）与G+C含量有关，G+C含量愈大，Tm愈低。 （×）
15. 扩增管没有盖好会造成PCR反应液热蒸发，直接影响结果，同时可成为一个污染源。 （√）
三．单选题（请将所选答案填写在题后的括号中，每题1分，共25分）
1.PCR技术的发明人是： （C）
A. Watson J.D. B. Crick F. H.C. C. Kary Mullis; D. Rosalind Franklin .
2. 下面哪种是容易造成PCR实验室环境污染的因素： （D）
A.中央空调 B.实验室和缓冲区无通风设施 C.人流和物流的走向 D.以上都是
3. 在生物界尚无充足证据的信息流动过程的是 （B）
A．DNA→RNA B．蛋白质→RNA C．DNA→DNA D．RNA→DNA
4.核酸提取纯化中，RNase潜在污染源是： （D）
A.实验室环境； B.实验用品如吸头、离心管等； C.实验人员的手； D.以上都是。
5. 下列哪一项不是PCR实验室设计的基本原则: （A）
A.各区联合； B.注意风向； C.因地制宜； D.方便工作。
6.有关于荧光定量PCR方法，下述哪一条是错误的？ （A）
A.在扩增的指数期定量； B.采用内标和外标方法均可；
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