山 东 化 工
aabb 收稿日期：２０２０－０９－０８
基金项目：营口理工学院２０１８年院级科研课题：紫外分光光度法在食品检测中的应用（ＹＹＬ２０１８０９）；营口理工学院２０２０年校级大学生创业项目：基于天然素的食品级儿童彩泥的研制
作者简介：付晓伟（１９８４—），女，辽宁营口人，毕业于辽宁师范大学，硕士，高级实验师，研究方向：现代仪器分析；通信作者：刘海燕（１９７２—），女，辽宁营口人，教授，博士，化学与材料工程系主任，研究方向：主要从事功能配位化学的研究。
紫外分光光度法测定水果中维生素Ｃ含量
付晓伟，吴 晓，姜莉莉，苑 蕾，张静玉，刘凤翊，刘海燕
（营口理工学院化学与环境工程学院，辽宁营口 １１５０１４）
摘要：维生素Ｃ（ＶＣ）是人体生理代谢所必需的一种化合物，它可以使人体生理机能保持稳定。本文采用醋酸为浸提剂，通过单因素和正
交实验对提取样品的料液比、浓度、时间、温度进行考察，确定了ＶＣ的最佳提取条件：浸提浓度为
２％，浸提温度为２０℃，料液比为１∶２（ｇ∶ｍＬ），提取时间为３０ｍｉｎ。利用紫外－可见分光光度法在最佳提取条件下对１０种水果样品的ＶＣ含量进行测定，结果表明ＶＣ含量：猕猴桃＞冰糖橙＞橙子＞桔子＞红心火龙果＞草莓＞油桃＞菠萝＞梨＞苹果，其中猕猴桃的ＶＣ含量最丰富，为４０７．５８ｍｇ／１００ｇ，苹果的最少为１４４．９５ｍｇ／１００ｇ。该方法检出限为０．００３ｍｇ／ｍＬ，ＲＳＤ＜１％，回收率在９６．６％－１０６．８％之间。关键词：紫外分光光度法；维生素Ｃ；含量测定中图分类号：Ｏ６５７．３２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８－０２１Ｘ（２０２０）２４－０１０２－０２
ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＶｉｔａｍｉｎＣｉｎＦｒｕｉｔｓｂｙＵＶｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ
ＦｕＸｉａｏｗｅｉ，ＷｕＸｉａｏ，ＪｉａｎｇＬｉｌｉ，ＹｕａｎＬｅｉ，ＺｈａｎｇＪｉｎｇｙｕ，ＬｉｕＦｅｎｇｙｉ，ＬｉｕＨａｉｙａｎ
（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｈｅｍｉｃａｌａｎｄＭａｔｅｒｉａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＹｉｎｇｋｏｕＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｙｉｎｇｋｏｕ １１５０１４，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＶｉｔａｍｉｎＣ（ＶＣ）ｉｓａｃｏｍｐｏｕｎｄｅｓｓｅｎｔｉａｌｆｏｒ
ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｏｆｔｈｅｈｕｍａｎｂｏｄｙ，ｗｈｉｃｈｃａｎｓｔａｂｉｌｉｚｅｔｈｅ
ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｆｕｎｃｔｉｏｎｓｏｆｔｈｅｈｕｍａｎｂｏｄｙ．Ｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒ
，ａｃｅｔｉｃａｃｉｄｗａｓｕｓｅｄａｓｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｎｇａｇｅｎｔ．Ｔｈｅｒａｔｉｏｏｆｍａｔｅｒｉａｌｔｏｌｉｑｕｉｄ，ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｔｉｍｅａｎｄｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏｆｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｅｄｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｂｙｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒａｎｄｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．ＴｈｅｏｐｔｉｍａｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆＶＣｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ：ｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｗａｓ２％，Ｔｈｅｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓｒａｉｓｅｄｔｏ２０℃，ｔｈｅｒａｔｉｏｏｆｍａｔｅｒｉａｌｔｏｌｉｑｕｉｄｗａｓ１∶２（ｇ∶ｍＬ），ａｎｄｔｈｅｌｅａｃｈｉｎｇｔｉｍｅｗａｓ３０ｍｉｎ．ＴｈｅｖｉｔａｍｉｎＣｃｏｎｔｅｎｔｏｆ１０ｆｒｕｉｔｓａｍｐｌｅｓｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＵＶ－ｖｉｓｉｂｌｅｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙｕｎｄｅｒｏｐｔｉｍａｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔＶＣ
ｃｏｎｔｅｎｔ：ｋｉｗｉｆｒｕｉｔ＞ｒｏｃｋｓｕｇａｒｏｒａｎｇｅ＞ｏｒａｎｇｅ＞ｏｒａｎｇｅ＞ｒｅｄｈｅａｒｔｄｒａｇｏｎｆｒｕｉｔ＞ｓｔｒａｗｂｅｒｒｙ＞ｎｅｃｔａｒｉｎｅ＞ｐｉｎｅａｐｐｌｅ＞Ｐｅａｒ＞Ａｐｐｌｅ，ｏｆｗｈｉｃｈｋｉｗｉｆｒｕｉｔｉｓｔｈｅｍｏｓｔａｂｕｎｄａｎｔ，４０７．５８ｍｇ／１００ｇ，ａｎｄａｐｐｌｅｉｓａｔｌｅａｓｔ１４４．９５ｍｇ／１００ｇ．Ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｌｉｍｉｔｏｆｔｈｅｍｅｔｈｏｄｉｓ０．００３ｍｇ／ｍＬ，ｔｈｅＲＳＤｉｓ＜１％，ａｎｄｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｉｓｂｅｔｗｅｅｎ９６．６％ａｎｄ１０６．８％．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ；ｖｉｔａｍｉｎＣ；ｂｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ 维生素Ｃ又称Ｌ－抗坏血酸，是人体正常生理代谢所必不可少的一种维生素，能调节人体氧化还原代谢反应，增强人体对外界环境的抗应激能力以及免疫能力，水果中ＶＣ含量丰富，是人体ＶＣ重要摄取来源之一。目前，测定ＶＣ的方法有高效液相谱法、荧光法、２，６－二氯靛酚滴定法、电化学分析法，本文采用紫外－可见分光光度法对ＶＣ的稳定性、最佳提取条件和１０种常见水果的ＶＣ含量进行了考察与测定，为人们鉴定水果营养价值及储存方式提供一定的参考。
１ 材料与方法
１．１ 材料
猕猴桃、冰糖橙、橙子、桔子、草莓、油桃、火龙果、菠萝、梨、
苹果均购自某农贸市场；抗坏血酸标准品（
ＡＲ）；冰乙酸（ＡＲ）；磷酸（ＡＲ）；盐酸（ＡＲ）；草酸（ＡＲ）。
１．２ 仪器
ＵＶ７５９ＣＲＴ紫外－可见分光光度计（上海佑科仪器有限公司）；ＪＹ电子天平（上海方瑞仪器有限公司）；ＧＺＸ－９２４６数显鼓风干燥箱（上海博迅实业有限公司）。
１．３ 提取工艺流程
水果样品→去蒂、清洗→研磨成匀浆→称取试样→加入提取剂→避光环境下浸提→４０００ｒ／ｍｉｎ离心处理→紫外－可见分光光度计测定（２４３ｎｍ）其吸光度→计算质量
１．４ 实验方法
准确称取５．００００ｇ预处理后的样品匀浆于烧杯中，按料液
情人节歌比（
ｇ∶ｍＬ）１∶２的比例加入２％醋酸溶液，在室温（２０℃）避光环境中浸提３０ｍｉｎ，将浸提
液在４０００ｒ／ｍｉｎ条件下离心处理１０ｍｉｎ，取上层清液定容至１００ｍＬ容量瓶后，用紫外可见分光光度计在最大吸收波长２４３ｎｍ处测定吸光度。每组试样做七次平行试验，取其平均值，根据维生素Ｃ标准曲线计算得出样品中维生素Ｃ的含量。
１．５ 紫外吸收曲线的测定
为了考察样品维生素Ｃ的含量，采用浓度为０．０８ｍｇ／ｍＬ的标准应用液和样品溶液在紫外－可见分光光度计上进行波长扫描，紫外吸收曲线见图１和图２
。
图１ ＶＣ标准品紫外吸收光谱图
·
２０１·ＳＨＡＮＤＯＮＧＣＨＥＭＩＣＡＬＩＮＤＵＳＴＲＹ ２０２０年第４９卷亲爱的姑娘我爱上你
第２４
期图２ ＶＣ样品紫外吸收光谱图
由图１及图２可以看出维生素Ｃ标准品的λｍａｘ＝２４３ｎｍ，水果样品的λｍａｘ＝
２４４ｎｍ，它们的最大吸收波长几乎一致，这说明维生素Ｃ在酸性溶液中的最大吸收波长为２４３ｎｍ。
１．６ 结果计算
将待测液的吸光度值代入维生素Ｃ标准曲线，查出待测样品浓度，再根据公式计算出样品中ＶＣ的含量。
ＶＣ含量＝
ｃ×Ｖ总×
１００Ｖ１×
ｍ２ 结果与讨论
２．１ ＶＣ提取正交实验结果分析
通过对料液比、醋酸浓度、提取时间、提取温度等单因素对ＶＣ提取效果的分析，进行正交实验。为了确定最佳提取效果，以提取液在λｍａｘ＝
２４３ｎｍ处吸光度为评判指标，对以上四个因素设计Ｌ９（３４）正交实验，因素水平表见表１，正交实验结果见表２。
表１ 正交因素水平表
水平料液比／（ｇ∶ｍＬ）醋酸浓度／％提取时间／ｍｉｎ提取温度／℃
１１∶２２．０３０２０２１∶３２．５４０３０３
１∶４
３．０
５０
４０
表２ 正交实验结果
试验号因素
ＡＢＣＤ提取量
／（ｍｇ／ｇ）１１１１１３．１７２１２２２２．５７３１３３３２．２４４２１２３２．２８５２２３１２．２２６２３１２２．３２７３１３２１．９８８３２１３２．０６９３３２１１．７７
Ｋ１７．９８７．４３７．５５７．１６Ｋ２６．８２６．８５６．６２６．８７Ｋ３５．８１６．３３６．４４６．５８Ｒ
０．７２
０．３７
０．３７
０．１９
由表２可以看出，以上四个因素对ＶＣ提取效果的影响的
主次顺序依次为Ａ＞
Ｂ＝Ｃ＞Ｄ，即：料液比＞醋酸浓度＝提取时间＞提取温度。从正交分析数据可以得出，维生素Ｃ的最佳提取条件为Ａ１Ｂ１Ｃ１Ｄ１，即：料液比１∶２（ｇ∶ｍＬ）、醋酸浓度２％、提取时间３０ｍｉｎ以及提取温度２０℃。
２．２ 维生素Ｃ标准曲线的绘制
本实验采用紫外－可见分光光度法对ＶＣ的含量进行了测定，将１ｍｇ／ｍＬ的ＶＣ标准储备液梯度稀释为０．０２，０．０４，０ ０８，０．１２，０．１６，０．２０ｍｇ／ｍＬ的系列溶液分别检测其吸光度。以质量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制维生素Ｃ标准曲线（见图３）
。
图３ ＶＣ标准曲线
由图３可以看出，维生素Ｃ在浓度为０．０２～０．２０ｍｇ／ｍＬ之间符合朗伯－比尔定律，有良好的线性关系，所得回归方程
西洋参的副作用为Ｙ＝３．７９９４Ｘ－０．００６６；相关系数Ｒ２
＝０．９９９６。
２．３ 样品含量测定
选取新鲜水果桔子、草莓、橙子、红心火龙果等１０种样品测定其中ＶＣ的含量，根据不同水果样品下测得的吸光度，在维
生素Ｃ标准曲线中读出提取浓度，
计算得出不同水果样品提取质量的柱状关系图，如图４
。
图４ 水果样品中ＶＣ含量
由图４可以得出，水果样品中维生素Ｃ含量顺序为猕猴桃（４０７．５８ｍｇ／１００ｇ）＞冰糖橙（３９０．８６ｍｇ／１００ｇ）＞橙子（３１９ ３１ｍｇ／１００ｇ）＞桔子（２８４．６５ｍｇ／１００ｇ）＞红心火龙果（２５３．３２ｍｇ／１００ｇ）＞草莓（２４４．７６ｍｇ／１００ｇ）＞油桃（２０１．０１
ｍｇ／１００ｇ
晶莹的近义词是什么?）＞菠萝（１８１．４４ｍｇ／１００ｇ）＞梨（１７０．９５ｍｇ／１００ｇ）＞苹果（１４４．９５ｍｇ／１００ｇ）。
２．４ 方法检出限
分别测定试剂空白８组，其吸光度值见表２．３，在置信度约为９９％时，其检出限ＭＤＬ＝ｔ（ｎ－１．０９９）×Ｓ＝０．００３ｍｇ／ｍＬ。
２．５ 精密度
实验对１０种水果样品分别制备７个平行样，检测其吸光度，计算含量。测得相对标准偏差（ＲＳＤ）在０．０９％～０．５８％之间，精密度较好。
（下转第１０５页）
·
３０１·付晓伟，等：紫外分光光度法测定水果中维生素Ｃ含量
第２４期
催化动力学应用范围。随着科学研究的不断深入与完善，催化动力学也将朝着更快速、更稳定的方向发展。
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）
（上接第１０１页）
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）
（上接第１０３页）
２．６ 加标回收率
采用样品加标的方法进行加标回收率测定，取三份样品加入不同浓度的标液测定其吸光度，平行测定６组，加标回收率在９６．６％～１０６．８％之间。
３ 结论
本文采用紫外分光光度法对生活中常见的水果中ＶＣ的含量进行测定分析，结果表明低浓度的醋酸在冷藏避光的条件下对维生素Ｃ具有一定的保护作用。通过单因素实验和正交实验得出：料液比对ＶＣ浸提效果影响较大，温度对提取效果影响较小，料液比１∶２（ｇ∶ｍＬ），浓度２％，时间３０ｍｉｎ，温度为２０℃时是最佳提取条件。测定结果表明：猕猴桃中ＶＣ含量较高，为４０７．５８ｍｇ／１００ｇ，苹果中的ＶＣ含量相对较低，为１４４．９５ｍｇ／１００ｇ。该方法检出限为０．００３ｍｇ／ｍＬ，ＲＳＤ＜１％，回收率在９６．６％～１０６．８％之间，本方法检测水果中ＶＣ的含量可以得到较好的结果。
小哨兵还原卡（本文文献格式：付晓伟，吴 晓，姜莉莉，等．紫外分光光度法测定水果中维生素Ｃ含量［Ｊ］．山东化工，２０２０，４９（２４）：１０２－１０３，１０５．）
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胡 平，等：催化光度法在痕量锰测定中的应用
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