常见水果抗氧化性效果研究
摘要 主要通过高锰酸钾能与抗氧化性物质反应而变,利用紫外-可见分光光度计测定高锰酸钾浓度的变化量从而测定18种常见水果汁液中的抗氧化性物质含量并进行比较。同时利用相同原理测定Al3+、Zn2+等5种常见金属离子对水果抗氧化性的影响。实验结果表明,橙、番石榴、芒果等具有良好的抗氧化性,而且金属离子能减弱水果的抗氧化性。
关键词 水果 抗氧化性 高锰酸钾 金属离子 分光光度法
衰老是人体各器官功能开始逐步降低的一种生理现象,当前科学界普遍采用Harman于1956年发表的衰老自由基学说[1]对衰老的产生进行解释。自由基损伤随着年龄的增长而加剧,从而引起衰老,并伴随一些慢性疾病的发生、发展。因此,清除自由基就成为人们当前抗衰老比较有效的方法。降低人体内自由基的含量,不仅要靠自身的清除系统,还要靠外部的帮助,而抗氧化剂就是我们所要寻求的帮助。
一些体外试验证实许多水果、蔬菜对氧自由基有显著清除作用,水果、蔬菜清除自由基的作用与它们富含抗氧化物质有关[2~4]。根据资料显示,抗氧化性的水果大多会包含以下几
种营养物质:黄酮类化合物、原花青素、维生素、多酚类物质等[5~7]。这些物质都具有一定的还原性(即抗氧化性)。笔者选择水果作为研究对象,寻当中有助于抗衰老的水果种类,并且对这些水果的抗氧化性进行基础研究,为大众通过食用水果抗衰老提供参考。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
去离子水、KMnO4(AR)、无水ZnCl2(AR)、无水MgCl2(AR)、无水CaCl2(AR)、C2H2O4·2H2O(草酸、AR)、无水FeCl3(AR)、无水AlCl3(AR)、H2SO4(浓,AR)。
草莓、沙糖桔、葡萄、木瓜、奇异果、圣女果、番石榴、梨、柠檬、苹果、橙、沙田柚、西红柿、火龙果、红萝卜、黑美人西瓜、芒果、香蕉。
电动离心机80-1,江苏金坛金伟实验仪器厂;PHS-25型酸度计,上海盛磁;衡新ACS系列电子称;美的榨汁机;紫外-可见分光光度计,上海佑科;量液管,上海求精生化试剂仪器
有限公司。
1.2 实验原理
在查阅文献的过程中,我们发现测定食物抗氧化性的方法主要有以下几种:(1)POV值的测定[8];(2)DPPH法[9];(3)FRAP法[10];(4)ABTS法[11]等,但这些方法却在中学无法实施。在高中化学课程中,笔者学过KMnO4具有强氧化性,能与还原性(即抗氧化性)物质反应,本实验将利用紫外-黑道少年花丛游可见分光光度计,通过测定KMnO4浓度的变化值,求出水果中所含的水溶性抗氧化性物质的总含量。此外,在查阅文献过程中,我们发现人体内的某些金属离子会对抗氧化剂的活性造成一定程度的影响[12],因此笔者还在实验中增加了人体中常见金属离子对水果抗氧化性活性的影响研究[13]。
1.3 实验步骤
经典美剧1.3.1 KMnO4标准溶液的配制及标定
将1.58 g KMnO4置于大烧杯中,加水至 1000 mL,煮沸约1小时,静置冷却后用微孔玻璃漏斗或玻璃棉漏斗过滤,滤液装入棕细口瓶中,贴上标签,一周后标定。保存备用。准
确称取0.10 g基准物质草酸3份,分别置于250 mL的锥形瓶中,加约30 mL水和3 mol/L H2SO4 10mL,盖上表面皿,在石棉铁丝网上慢慢加热到70~80℃(刚开始冒蒸气的温度),趁热用KMnO4溶液滴定。根据草酸的质量和消耗KMnO4溶液的体积计算KMnO4浓度,并用同样方法滴定其他2份草酸溶液。
面试报名时间1.3.2 KMnO4溶液最大吸收波长的确定
将已测定浓度的KMnO4溶液放进紫外-可见光分光光度计中,以蒸馏水作参比,从波长为 400 nm到700 nm,每隔10 nm测定KMnO4溶液的吸光度。
由于KMnO4反应后产生的Mn2+溶液有颜,因此可能对KMnO4的浓度产生一定程度的影响,所以需要对Mn2+溶液和KMnO4溶液的最大吸收波长比较,从而选择出最适合测定KMnO4浓度的吸收波长。
图1 KMnO4溶液和Mn2+溶液最大吸收波长测定
将配好的0.1 mol/L的MnCl2溶液放进紫外-可见分光光度计中,以蒸馏水作参比,从波长为400 nm到700 nm,每隔10 nm测定MnCl2溶液的透光度。通过作图,出最适合测定KMn
O4浓度的吸收波长(图1)。
由图1可以看出,在530 nm处KMnO4溶液有强吸收,而Mn2+溶液在工行白金信用卡530 nm处吸收并不大,因此笔者选取530 nm作为KMnO4溶液的最大吸收波长。
1.3.3 KMnO4溶液标准曲线测定
取10个容量瓶并标号1~10,在1号容量瓶中加入准确量取的1 mL KMnO4标准溶液,在2号瓶中加入准确量取的0.9 mL KMnO4标准溶液,如此类推依次加入一定量的KMnO4标准溶液,然后用蒸馏水定容后摇匀,静置。以蒸馏水为空白,测定各浓度KMnO4标准溶液的吸光度(图2)。
图2 KMnO4标准溶液的标准曲线
由图2可以看出,在530 nm波长下,KMnO4溶液浓度与吸光度呈现出良好的线性关系,其线性方程为y=0.0004x+4×10-6(x为吸光度,y为KMnO4溶液浓度),相关系数R 2=0.9996,该标准曲线具有较高的信度和精度。
1.3.4 样品抗氧化性测定
将所有水果样品用自来水、蒸馏水反复冲洗干净后,用榨汁机榨汁,并用4000 rpm 离心机离心 5 min后取上清液,备用。用量液管取0.2 mL水果汁液和0.8 mL KMnO4标准溶液于100mL容量瓶中,用蒸馏水定容。用量液管取0.2 mL水果汁液于100 mL如何提取公积金容量瓶中,并用蒸馏水定容,作为空白,用紫外-可见分光光度计测定水果汁液样品中反应后KMnO4的浓度。
1.3.5 Fe3+溶液与KMnO4标准溶液吸收波长的比较
图3 Fe3+溶液与KMnO4标准溶液透光度比较
由于Fe3+溶液为浅黄溶液,可能对吸光度测定有影响,所以先用蒸馏水做空白,测定Fe3+溶液在400nm至700nm的透光度,并与KMnO4标准溶液在相同波长范围内的透光度进行比较(图3)。
由图3可见,当KMnO4标准溶液在530 nm吸收最大时,Fe3+溶液的吸收较少,所以Fe3+溶液对KMnO4溶液浓度的测定可以忽略。
1.3.6 金属离子对水果抗氧化性影响的测定
分别称取0.5 g无水ZnCl2、无水旅游必去MgCl2、无水CaCl2、无水FeCl3、无水AlCl3,用少量蒸馏水溶解后转移至100 mL容量瓶中,并用量液管取0.2 mL水果汁液于100 mL容量瓶中,振荡静置2 min后,用量液管取0.8 mL KMnO4标准溶液于100 mL容量瓶中用蒸馏水定容。
用量液管取0.2 mL水果汁液于100 mL容量瓶中,并用蒸馏水定容,作为空白,用紫外-可见分光光度计测定加入金属盐后,水果样品中反应后 KMnO4的浓度。
2 实验数据处理及分析
2.1 各种水果抗氧化性比较
通过计算KMnO4与各种水果汁液反应后的吸光度平均值,然后用将0.8 mL KMnO4标准溶液稀释至100 mL后的吸光度减去各种水果的吸光度,求出吸光度差值,并将吸光度差值带入线性方程为y=0.0004x+4×10-6(x为吸光度,y为KMnO4溶液浓度),求出KMnO4标准溶液浓度的变化值,最后求出每 0.2 mL水果汁液消耗的KMnO4的物质的量,如表2所示。
版权声明:本站内容均来自互联网,仅供演示用,请勿用于商业和其他非法用途。如果侵犯了您的权益请与我们联系QQ:729038198,我们将在24小时内删除。
发表评论