实验一 紫外分光光度法测定兔血清中氨茶碱的浓度
一、实验目的
1.掌握紫外分光光度法测定测定血浆中氨茶碱含量的基本原理
我的母亲阅读答案2.熟悉紫外分光光度法测定血浆中氨茶碱含量的基本操作
3.了解血样收集方法及血清样品的一般处理方法
二、实验材料
动物：家兔
实验材料：紫外分光光度计、离心机、容量瓶、移液管、注射器、胶头滴管、烧杯、刀片等清蒸鱼的做法大全
试剂及试药：氯仿、异丙醇、NaO、HCL
三、实验原理
茶碱用于支气管哮喘及其他呼吸不正常的疾病。茶碱的血药浓度较窄（5~20ug/ml），血浓高于25ug/ml时常出现中毒症状。氨茶碱个体差异大，服用同剂量氨茶碱的病人之间的效果有明显差异，且与血药浓度有关，因此需要进行临床用药监护。
茶碱不易溶于水，对胃肠道有刺激作用，古临床上常用其盐类制剂。氨茶碱系茶碱和乙二胺缩合而成，其溶解度为茶碱的20倍，在体液中分离出茶碱起效。在酸性条件下，可用有机溶剂从血浆中提出茶碱，并同时沉淀血浆蛋白；再用碱溶液把茶碱从有机溶剂中提出。在λ274测定碱性吸收液的吸收度（A）。A274为茶碱和本底（溶剂、血清）吸收度。
四、试验方法
（一）标准曲线的绘制
1.称取氨茶碱标准品100mg，置200ml容量品中，加0.1mol/L NaOH溶液至刻度，得0.5mg/ml的氨茶碱标准。
2.依次取氨茶碱标准溶液5uL、10uL、15uL、20uL、30uL、50uL于10ml容量瓶中，用0.1
mol/lNaOH溶液定容，以0.1mol/L NaOH溶液为空白。测定其吸光度
周星驰的所有电影3.以吸光度为横坐标、浓度为纵坐标绘制曲线
（二）血样处理
房产证办理先将家兔称重，取氨茶碱注射剂按15mg/Kg体重，兔耳缘静脉注射氨茶碱。
小学班级口号大全从家兔的另一只耳缘静脉抽取3ml血液（10min,30min,1h,2h,3h,4h,5h），静置待血液凝固后，置于离心机中离心（3500/min）离心10min 分离血清，用胶头滴管吸取0.5ml 置离心管中，加0.1mol/L HCL溶液0.2ml ，精密加入氯仿；异丙醇（95:5）溶液6ml ，振摇混匀，离心（2500r/min ）10min ,用移液管吸取氯仿层（下层）4.0ml 置另一离心管中，加入0.1mol/L NaOH 6.0ml ，振摇混匀, 离心（2500r/min ）10min, 用移液管吸取碱液（上层）5 ml ,用同法处理其他样品，供测定用。
（三）样品测定
将血样经上述方法处理后，在274nm 下测定吸光度，以时间为横坐标，血清中药物浓度为纵坐标，根据标准曲线绘制时间与血药浓度曲线。
五、实验结果
mate30 pro1.标准曲线
Y=0.0702X-0.0091 R²=0.9990
2.样品实测数据
六、注意事项
1.兔子采血时要注意要在同一伤口处，将兔耳低于心脏，采血完毕后要立即之血。
2.分离血清时，要把血液放置待凝后，离心取血清；
3.离心机往往不尽人意，可适当提高转速和时间，记住离心前一定要配平；
4.吸取下层氯仿液时要注意将使离心管倾斜以便于将移液管深入管底而又防止粘上过多的血清絮状物；
5.分离血清时要将血液静止足够长的时间，否则会导致离心效果不理想，无法得到足够量的血清；
6.如果分离血清量不够，可以提高转速或者重复离心。如果血清分离不够，要记住血清的体积
7.每一步定量要准确，否则影响结果。
七、思考题
1.临床药物检测的范围有哪些？
2.临床药物检测的常用方法有哪些？
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