二乙酰一肟氨基硫脲法检测游泳池水中尿素
饶国强
武义县疾病预防控制中心 321200
尿素含量是游泳池水质检验中一项重要的卫生指标,国标方法GB/T18204.29-2000中用的二乙酰一肟安替比林法存在显后遇光褪,线性范围窄的缺点。本人借鉴临床生化检验中的尿素氮测定方法,设计了二乙酰一肟氨基硫脲比法,结果令人满意。
1.原理
尿素在氨基硫脲存在下,与二乙酰一肟在强酸环境中加热,生成红的二嗪衍生物。显强度在一定范围内与尿素含量成正比。
2.材料与方法
2.1 仪器 721-分光光度计
2.2 试剂
2.2.1 酸性试剂 浓硫酸200ml与磷酸300ml混匀,冷至室温。加氨基硫脲50mg,硫
酸镉2.0g溶解,棕瓶冷藏至少可保存一年。
同人是什么2.2.2 二乙酰一肟溶液 称取4.0g会当凌绝顶的下一句二乙酰一肟,溶解后加纯水至200ml,棕瓶冷藏可
保存半年。
2.2.3 尿素标准贮存液 准确称取0.1000g尿素,加少量纯水溶解后,移至1000ml容量
瓶中,加5滴作防腐剂,用纯水定容至刻度。4℃保存,此溶液尿素浓度为0.1mg/ml。
2.2.4 尿素标准使用液 临用时将尿素标准贮存液稀释10倍。此溶液尿素浓度10ug/ml。
2.3 操作步骤
2.3.1取水样10ml于具塞标准比管中。另取比管8只,分别加入10ug/ml的尿素标
准使用液0、0.10、0.25、0.50、1.00、2.00、3.00、四月最美诗句5.00ml,各加水至约10ml。
2.3.2 每管各加酸性试剂5.0ml,2%的二乙酰一肟溶液2.0ml,加纯水至25ml。沸水浴
12分钟,取出后用冷水冷却至室温。
2.3.3 以空白管调零,在540nm处,用1cm比皿测定各管吸光值。以浓度对照吸光
值,制备标准曲线。以水样的吸光值在标准曲线上查出尿素含量。
2.3.4 计算
C= | M | ×1000 |
V | ||
试中:C―水样中尿素浓度,mg/L;
M-从回归方程算得水样中尿素质量,ug ;
V-水样体积,ml。
3.结果与讨论
3.1 加热时间
国标法中的加热时间为50分钟,而本法加热12分钟即可完全显。
3.2 显稳定性
酸性试剂中的氨基硫脲与硫酸镉可促进尿素与双乙酰结合,提高灵敏度和显后的
稳定性。国标法显后的溶液遇光易褪,本法溶液显后至少可以稳定2h吸光值
无变化。
3.3 最低检出限与线性范围
本法的最低检测量为1.0ug,若取10ml水样,最低检测限为0.1mg/L。在1-50ug
范围内,有良好的线性关系。
3.4 标准曲线及回归方程
标准曲线制备见表1,回归方程Y= -0.124+67.821X r=0.9998
表1 标准曲线制备
Y标准含量(ug) | 泳池水质标准x±s | 变异系数(%) |
1.0 | 0.015±0.0012改变旧貌迎猴年打一字 | 6.7 |
2.5 | 0.040±0.0026 | 6.5 |
5.0 | 0.075±0.0044 | 5.8 |
10.0 | 0.155±0.0051 | 3.2 |
20.0 | 0.290±0.0094 | 3.2 |
30.0 | 0.445±0.0086 | 1.9 |
50.0 | 0.740±0.0125 | 1.7 |
3.5 回收率试验
各取4份含不同浓度尿素的游泳池水样10ml,分别加入10ug/ml的尿素标准使用液
1.0ml测回收率,结果见表2。
表2 回收率试验结果
样品号 | 原含量(ug) | 桑蚕丝怎么洗加入量(ug) | 测得量(ug) | 回收率(%) |
1 | 8.8 | 10 | 18.4 | 96.0 |
2 | 5.0 | 10 | 14.5 | 95.0 |
3 | 6.3 | 10 | 16.4 | 101.0 |
4 | 6.7 | 10 | 16.5 | 98.0 |
3.6本法操作简便,溶液显稳定,线性范围宽,试剂稳定时间长,适合平时工作中使用。
参考文献:
1、公共场所卫生标准检验方法 GB/T18204.29-2000。
2、王同明.生物化学及检验技术.第一版.江苏科学技术出版社,1987。
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