(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910141723.6
(22)申请日 2019.02.26
(66)本国优先权数据
201810184031.5 2018.03.06 CN
(71)申请人 中国科学院高能物理研究所
地址 100049 北京市石景山区玉泉路19号
(乙)
(72)发明人 何潇 罗文赫
(74)专利代理机构 北京君尚知识产权代理事务
所(普通合伙) 11200
代理人 司立彬
(51)Int.Cl.
G01N 15/10(2006.01)
(54)发明名称一种单细胞中金纳米棒的绝对定量检测方法(57)摘要本发明提供了一种单细胞中金纳米棒的绝对定量检测方法，首先采用光刻胶技术制作标准样品板，得到一系列含有AuNRs的样品点坑阵列，然后对样品点坑中的AuNRs进行计数统计，同时测定对应样品点坑中Au的含量，根据Au含量与AuNRs数量之间的对应关系建立AuNRs绝对定量检测标准，最后使含AuNRs暴露处理过的细胞呈单细胞分布，测定每个细胞中Au的含量，根据AuNRs绝对定量检测标准曲线，统计出每个细胞中吞的AuNRs数量。利用该方法可以比较不同肝脏细胞对金纳米棒摄取的能力，创建不同浓度、不同修饰的金纳米棒在小鼠肝脏细胞中分布的模型，可在细胞层面开展对动物活体代谢行为的研究。同时，该方
法还可以应用于其他容易在SEM
下进行计数统计的纳米颗粒的绝对定量检测。权利要求书1页 说明书4页 附图4页CN 109765164 A 2019.05.17
C N 109765164
A
权 利 要 求 书1/1页CN 109765164 A
1.一种单细胞中金纳米棒的绝对定量检测方法，包括以下步骤：
(1)采用光刻胶技术制作标准样品板，得到一系列含有AuNRs的样品点坑阵列；
(2)对样品点坑中的AuNRs进行计数统计，同时测定对应样品点坑中Au的含量，根据Au 含量与AuNRs数量之间的对应关系建立AuNRs绝对定量检测标准；
(3)使含AuNRs暴露处理过的细胞呈单细胞分布，测定每个细胞中Au的含量，根据上述AuNRs绝对定量检测标准曲线，统计出每个细胞中吞进的AuNRs数量。
2.如权利要求1所述一种单细胞中金纳米棒的绝对定量检测方法，其特征在于，步骤(1)中所述标准样品板基底采用聚甲基丙烯酸甲酯表面修饰的具有纳米级平整度的OLED-ITO导电玻璃。
3.如权利要求1所述一种单细胞中金纳米棒的绝对定量检测方法，其特征在于，步骤(1)中所述样品点坑的直径为5-30μm，深度为200-500nm。
4.如权利要求1所述一种单细胞中金纳米棒的绝对定量检测方法，其特征在于，步骤(2)中利用SEM对所述样品点坑中的AuNRs进行计数统计。
5.如权利要求1所述一种单细胞中金纳米棒的绝对定量检测方法，其特征在于，步骤(2)中利用LA-ICP-MS测定对应样品点坑中Au的含量。
6.如权利要求1所述一种单细胞中金纳米棒的绝对定量检测方法，其特征在于，步骤(3)中使用细胞微孔板实现使细胞基本呈单细胞分布。
7.如权利要求6所述一种单细胞中金纳米棒的绝对定量检测方法，其特征在于，所述细胞微孔板的制备材料为PDMS，制备的孔径和深度的尺寸根据测定细胞的大小确定。
8.如权利要求1所述一种单细胞中金纳米棒的绝对定量检测方法，其特征在于，步骤(3)中利用LA-ICP-MS测定每个细胞Au的含量。
9.一种单细胞中纳米金属颗粒的绝对定量检测方法，包括以下步骤：
(1)采用光刻胶技术制作标准样品板，得到一系列含有一种纳米金属颗粒样品的点坑阵列；
(2)对样品点坑中的所述纳米金属颗粒进行计数统计，同时测定对应样品点坑中该纳米金属颗粒的含量，根据所述纳米金属颗粒含量与其数量之间的对应关系建立该纳米金属颗粒绝对定量检测标准；
icp申请(3)使所述纳米金属颗粒暴露处理过的细胞呈单细胞分布，测定细胞微孔板中每个细胞该纳米金属颗粒的含量，根据上述绝对定量检测标准曲线，统计出每个细胞中吞进的纳米金属颗粒的数量。
10.如权利要求9所述一种单细胞中纳米金属颗粒的绝对定量检测方法，其特征在于，步骤(1)中所述纳米金属颗粒为在SEM下能够进行计数统计的纳米颗粒，包括球状或棒状的纳米颗粒。
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