食用菌原种和栽培种培养料的制作实验
一、目的要求
掌握常见食用菌原种和栽培种培养基的制作、接种和培养技术。
二、材料与用具
(1)材料:优质小麦、 棉籽壳、木屑、稻草、玉米面、葡萄糖或蔗糖、右膏粉、碳酸钙等。
(2)用具:电户、 大铝锅、大盆、菌种瓶、12cm x 12cm x0.02cm高压聚丙烯塑料膜、线绳、接种箱、超净工作台、酒精灯等。
三、内容与方法
(一)培养基的制作
1.麦粒原种培养基制作
谷粒(如麦粒，玉米粒)南种培养基制作难度较大，但优点很多。谷粒营养丰富，大小适中，是
绝大多数种类食用菌原种制作的最佳原料。现以小麦原种培养基制作为例，介绍如下。
(1)麦粒培养基配方:常用麦粒培养基配方为小麦99%、石膏粉1%。
(2)制作方法
①泡小麦:冬天浸泡24 ~ 48h,隔夜换水;夏天浸泡10~12h,隔友换水，可加人1%石灰浸泡。泡好后，小麦粒饱胀，用清水漂洗干净，除去杂质。
②煮小麦:煮至充分吸水，无白心，切忌煮开花。
③木腐生菌类一般添加一定量木屑(10%左右)效果更好:木屑可用煮小麦的水拌料，料:水以1:0.5的比例拌和，或酌情处理;可添加木屑干重0. 5%的蔗糖、0. 5%的尿素、1% 的石灰。
④装瓶:将小麦粒捞出后，趁热滩平，使表面多余水分蒸发，然后加人石膏粉或其他辅料拌匀，再将料装至瓶肩处即可。
⑤封瓶口:用两层完整的塑料膜封瓶口并套好皮筋。
⑥灭菌:麦粒菌种一般 采用高压灭菌方式。高压灭黄于126℃左右维持2h即可。其排冷气，开锅方法同斜面培养基制作。
2.其他原料制作原种和栽培种培养基
(1)粪草培养基(适于制作双孢磨菇菌种)
凤尾菇栽培技术配方:粪草(粪:草=6:4, 堆积发酵15 -20d) 90g,， 米桃或麸皮8g，碳酸钙1kg，糖1Kg，水适量。
制作方法:先将粪草堆积发酵，发酵时间18d左右，其间加人米糠等辅料，翻准2-3次，晒干，切碎，装瓶，灭菌。灭菌方法同麦粒培养基。
(2)木屑-米糠培养基(适宜各种木腐生食用菌)
配方:阔叶树木屑70%~ 80%，米糠或麸皮20%~28%，碳酸钙1%， 蔗糖1%，石膏1%，水调至适量。
制作方法:先将蔗糖溶于清水中，然后与杂木屑、米糠(或麸皮)等材料拌和。培养含水量以60
% ~ 65%为宜。加水量依木屑种类而异，-殷每100kg干料加水120~ 140kg,手培养基，指间有水泌出而又不下滴为度。培养基配好后，装人菌种瓶中，用直径1. 5cm尖棒在培养基中间钻直通瓶底的洞孔， 使灭菌更彻底， 也有利于菌丝的蔓延。 瓶内外洗擦干，塞上棉塞，瓶口用牛皮纸包扎，灭菌后备用。灭菌方法同粪草培养基。
(3)棉籽壳培养基(适于平菇、凤尾菇)
配方:棉籽壳99%，石灰粉(或石膏粉) 1%。 也可另外加人10%玉米粉或米糠，则营养更为丰富。
制作方法:先将石灰粉(或石膏粉)溶于适量水中，再用水溶液拌料，含水量以60%—65%为宜。然后装瓶，灭菌，冷却备用。
(4)稻草培养基(适于草菇、平菇、凤尾菇等)
配方:稻草93%，麸皮5%， 石膏1%，蔗糖1%。
制作方法:先将稻草切成lcm长的小段，用水浸湿，堆制1-2d，待稻草吸水软化后，拌人18%米糠(或5%麸皮)以及蔗糖和石膏粉，培养基含水量达65% ;然后装瓶、灭菌。
(5)玉米芯培养基
配方:玉米芯99%，石膏粉1%。也可另外加人10%玉米粉或米糠，以提高基质营养成分。
制作方法:先将玉米芯粉碎成蚕豆粒大小，然后用水浸泡工1 ~2d,沥干水，拌入石膏粉等辅料，再装瓶、灭菌，冷却备用。
(二)接种
原种及栽培种培养基灭菌后应及时运送至无菌环境中，待料温降至约30℃时，进行抢温接种。
1.原种接种
用接种耙或20cm大镊子取蚕豆大母种(连同培养基)，放于瓶中培养料表面中央的孔口处，1支母种接5 ~8瓶原种。接完后贴标签置适温下培养。
2.栽培种接种
用大镊子、接种铲或接种匙取红枣大小原种，放于瓶或袋申料面上(若两端扎活结的菌种袋，每端都要接人原种)，然后封瓶口或用棉塞、线绳扎袋口。1瓶原种约接60瓶或25袋栽增种。最后贴上标签，注明菌种名称和接种日期，置适温下培养。
(三)原种和栽培种的培养
将已接种的原种和栽培种放入培养箱或培养室中造温培养，4d后定期检查菌丝生长情况，发现污染及时清除。
四、作业与思考题
(1)比较几种不同培养料制作原种和栽培种培养基的异同点。
(2)麦粒浸泡的好处是什么?
(3)原种和栽培种培养基制作过程中，应注意哪些事项?
答：（1）
（2）麦粒吸水调湿后含水量必须适度。含水过低，质地硬、菌稀穿透难、繁殖数量少、播种后易染菌；含水过高，质地软泡、灭菌时易破裂、淀粉渗出糊状、易使麦粒粘结成团、菌丝蔓延后会产生菌被现象。此外，填充料预湿后的含水量应与麦粒含水量接近。
（3）原种和栽培种注意事项
1)培养基含水量是否适宜滑菇菌丝体的生长发育与 培养基含水量有关，只有含水量适宜，菌丝生长才旺盛健壮，通常要求培养基含水量在60%〜65%，即手紧握培养料，以手指缝中有水外渗往下滴1〜2滴为宜，没有水渗为过干，有水滴连续淌下为过湿，过干或过湿均会对菌丝生长不利。
2)培养基的pH值是否适宜一般滑菇正常生长发育 需要一定范围的pH值，一般要求偏酸性，即pH值为5。因此，灭菌前的pH值应比指定的略高些。
3)装好瓶（袋）的培养基应及时灭菌培养基装完瓶(袋)后应立即灭菌，特别是在高温季节，严禁把培养基放置过夜，以免由于微生物的作用而导致培养基酸败，危害菌丝生长。
4)严格检查所使用菌种的纯度和生活力即检查菌种内或棉塞上有无霉菌及杂菌侵人所形成的
拮抗线、湿斑，有明显杂菌侵染或有怀疑的菌种、培养基开始干缩或在瓶壁上有大量黄褐分泌物的菌种、培养基内菌丝生长稀疏、大多是细线状菌索的菌种、没有标签的可疑菌种，均不能用于菌种生 产。
(5) 菌种长满菌瓶后，应及时使用一般来说，原种满瓶 后7〜8天，最适于扩转栽培种，栽培种满瓶（袋）7〜15天时 最适于播种。如来不及使用，应将其放在凉爽、干燥、清洁的 室内避光保藏。在10℃以下低温保藏时，原种不能超过3个月，栽培种不能超过2个月。
五．实验结果
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