瘤胃微生物rna提取中样品前处理方法的优化
㊀基金项目：国家重点研发计划项目(２０１７ＹＦＤ０５００５０２)ꎻ国家自然科学基金项目(３１４３００８１)ꎻ中国农业科学院农业科技创新㊀工程重大产出科研选题项目(ＣＡＡＳ￣ＺＤＸＴ２０１９００４)ꎻ中国农业科学院科技创新工程项目(ＡＳＴＩＰ￣ＩＡＳ１２)㊀
作者简介：刘思佳㊀女ꎬ硕士研究生ꎮ研究方向为营养与饲料科学ꎮＴｅｌ:０１０￣６２８１６０６９ꎬＥ￣ｍａｉｌ:ｌｉｕｓｉｊｉａ１２１４＠１６３.ｃｏｍ㊀∗通讯作者ꎮ男ꎬ博士ꎬ研究员ꎮ研究方向为反刍营养与饲料科学ꎮＴｅｌ:０１０￣６２８１６０６９ꎬＥ￣ｍａｉｌ:ｊｉａｑｉｗａｎｇ＠ｖｉｐ.１６３.ｃｏｍ㊀收稿日期:２０１９￣０９￣０５瘤胃微生物ＲＮＡ提取中样品前处理方法的优化
刘思佳ꎬ赵圣国ꎬ郑㊀楠ꎬ王加启∗
(中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养国家重点实验室ꎬ北京㊀１００１９３)红星闪闪 歌词
摘㊀要㊀通过优化瘤胃液前处理方法ꎬ提高瘤胃微生物ＲＮＡ提取数量与质量ꎮ试验优化４个前处理条件ꎬ共组合形成５个处理组ꎮ前处理完成后ꎬ利用Ｔｒｉｚｏｌ进行ＲＮＡ提取ꎬ检测ＲＮＡ浓度和完整度(ＲＩＮ)ꎮ结果显示ꎬ提取瘤胃内容物和瘤胃菌体ＲＮＡ浓度和完整度的影响没有显著差异(Ｐ>０.０５)ꎮ液氮保存的样品提取的ＲＮＡ浓度和完整度均显著(Ｐ<０.０５)高于ＲＮＡ保护液保存的样品ꎮ解冻处理对ＲＮＡ浓度的影响无显著差异(Ｐ>０.０５)ꎬ但是不解冻处理提取的ＲＮＡ完整度显著高于解冻处理(Ｐ<０.０５)ꎮ液氮冷冻研磨提取的ＲＮＡ瑞士国际酒店管理大学>九州缥缈录什么时候播
浓度(Ｐ<０.０５)显著高于常温研磨ꎬ但是对ＲＮＡ完整度的影响没有显著差异(Ｐ>０.０５)ꎮ瘤胃内容物㊁液氮速冻㊁不解冻处理结合冷冻研磨方法所提取ＲＮＡ的ＲＩＮ值为９.４３ꎬ完整度最高ꎮ瘤胃内容物㊁液氮速冻㊁解冻离心收集菌体结合冷冻研磨方法所提取的ＲＮＡ浓度为１０４８ｎｇ/μＬꎬ为最高浓度ꎮ因此ꎬ瘤胃内容物直接液氮速冻并在不解冻条件下冷冻研磨ꎬ所提取的ＲＮＡ效果最好ꎬ可用于后续宏转录组学试验ꎮ
关键词㊀瘤胃液ꎻ前处理ꎻ破碎温度ꎻＲＮＡ提取ꎻ优化ꎻＲＮＡ质量4年级下册数学期末试卷答案
中图分类号㊀Ｑ９３－３㊀㊀㊀文献标识码㊀Ａ㊀㊀㊀文章编号㊀１００５－７０２１(２０２０)０１－００８８－０６
ｄｏｉ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１００５－７０２１.２０２０.０１.０１２ＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆＳａｍｐｌｅＰｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｉｎＲｕｍｅｎＭｉｃｒｏｂｉａｌＲＮＡＥｘｔｒａｃｔｉｏｎ
赚钱行业ＬＩＵＳｉ￣ｊｉａꎬＺＨＡＯＳｈｅｎｇ￣ｇｕｏꎬＺＨＥＮＧＮａｎꎬＷＡＮＧＪｉａ￣ｑｉ
(ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂ.ｏｆＡｎｉｍ.ＮｕｔｒｉｔᶄｎꎬＩｎｓｔ.ｏｆＡｎｉｍ.Ｓｃｉ.ꎬＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄ.ｏｆＡｇｒｉｃ.Ｓｃｉ.ꎬＢｅｉｊｉｎｇ１００１９３)Ａｂｓｔｒａｃｔ㊀Ｔｈ目字旁的有什么字
ｅａｉｍｏｆｔｈｉｓｓｔｕｄｙｗａｓｔｏｏｐｔｉｍｉｚｅｔｈｅｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｒｕｍｅｎｆｌｕｉｄａｎｄｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｑｕａｎｔｉｔｙａｎｄｑｕａｌｉｔｙｏｆＲＮＡｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｉｎｒｕｍｅｎｍｉｃｒｏｂｅｓ.Ｆｏｕｒｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｉｎｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｗｅｒｅｏｐｔｉｍｉｚｅｄꎬａｎｄｔｈｅｔｏｔａｌｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓｔｏｆｏｒｍｆｉｖｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐｓ.ＡｆｔｅｒｔｈｅｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｃｏｍｐｌｅｔｅｄꎬＲＮＡｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｗｉｔｈＴｒｉｚｏｌꎬａｎｄｄｅ￣ｔｅｃｔｅｄｔｈｅＲＮＡｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄｉｎｔｅｇｒｉｔｙ(ＲＩＮ).ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄｉｎｔｅｇｒｉｔｙｏｆＲＮＡｅｘ￣ｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍｒｕｍｅｎｃｏｎｔｅｎｔｓａｎｄｒｕｍｅｎｍｉｃｒｏｂｉａｌｃｅｌｌｓｈａｄｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ(Ｐ>０.０５).ＴｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄｉｎｔｅｇｒｉｔｙｏｆＲＮＡｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍｓａｍｐｌｅｓｐｒｅｓｅｒｖｅｄａｎｄｇｒｏｕｎｄｉｎｌｉｑｕｉｄｎｉｔｒｏｇｅｎｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｐｒｅｓｅｒｖｅｄｉｎＲＮＡｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎｓｏｌｕｔｉｏｎ(Ｐ<０.０５).ＴｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｔｈａｗｉｎｇｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｎＲＮＡｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ(Ｐ>０.０５)ꎬｈｏｗｅｖｅｒｔｈｅｉｎｔｅｇｒｉｔｙｏｆＲＮＡｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙｒｕｍｅｎｆｌｕｉｄｗｉｔｈｕｎ
ｔｈａｗｉｎｇｔｒｅａｔｍｅｎｔｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｗｉｎｇｔｒｅａｔｍｅｎｔ(Ｐ<０.０５).ＴｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆＲＮＡｅｘｔｒａｃｔｅｄｉｎｌｉｑｕｉｄｎｉｔｒｏｇｅｎｆｒｏｚｅｎａｎｄｇｒｏｕｎｄｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒ(Ｐ<０.０５)ｔｈａｎｔｈａｔｇｒｏｕｎｄｉｎｒｏｏｍｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅꎬｂｕｔｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＲＮＡｉｎｔｅｇｒｉｔｙ(Ｐ>０.０５).ＴｈｅＲＩＮｖａｌｕｅｏｆＲＮＡｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍｒｕｍｅｎｃｏｎ￣ｔｅｎｔｓｉｎｌｉｑｕｉｄｎｉｔｒｏｇｅｎｑｕｉｃｋ￣ｆｒｅｅｚｉｎｇａｎｄｕｎｔｈａｗｅｄｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｆｒｅｅｚｅ￣ｇｒｉｎｄｉｎｇｍｅｔｈｏｄｗａｓ９.４３ꎬｔｈｅｉｎｔｅｇｒｉｔｙｗａｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔ.ＴｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆＲＮＡｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍｒｕｍｅｎｃｏｎｔｅｎｔｓｕｓｉｎｇｌｉｑｕｉｄｎｉｔｒｏｇｅｎｑｕｉｃｋｆｒｅｅｚｉｎｇꎬｔｈａｗｅｄａｎｄｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅｄｔｏｃｏｌｌｅｃｔｍｉｃｒｏｂｉａｌｃｅｌｌｓｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｆｒｅｅｚｅ￣ｇｒｉｎｄｉｎｇｍｅｔｈｏｄｗａｓ１０４８ｎｇ/μＬꎬｗｈｉｃｈｗａｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ.Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅꎬｄｉｒｅｃｔｌｉｑｕｉｄｎｉｔｒｏｇｅｎｑｕｉｃｋ￣ｆｒｅｅｚｉｎｇａｎｄｇｒｉｎｄｉｎｇｕｎｄｅｒｕｎｔｈａｗｉｎｇｃｏｎｄｉｔｉｏｎꎬｔｈｅｒｕｍｅｎ８８微生物学杂志㊀２０２０年２月第４０卷第１期㊀ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＭＩＣＲＯＢＩＯＬＯＧＹＦｅｂ.２０２０Ｖｏｌ.４０Ｎｏ.１

版权声明：本站内容均来自互联网，仅供演示用，请勿用于商业和其他非法用途。如果侵犯了您的权益请与我们联系QQ:729038198，我们将在24小时内删除。