ImageJ实⽤技巧——荧光明场图⽚合并和分割（基本功能篇）拍免疫荧光或者荧光转染的时候，⼀定会遇到不同颜⾊荧光照⽚合并与分割，以及荧光和明场照⽚的合并问题。
虽然⼤部分情况下，拍照软件会完成这⼀⼯作，但如果想对某⼀颜⾊的图⽚进⾏修改，然后再合并，或者提取某⼀个通道的照⽚，这时候就需要ImageJ了。
矮个子穿衣搭配图片ImageJ中的这⼀功能较为基础，不需要插件，作为基础功能篇的第⼀篇，主要介绍怎么利⽤ImageJ对荧光照⽚合并、分割，以及荧光与明场之间合并。
⼀、不同荧光照⽚合并、分割
服装地摊货批发网（1）合并
1、打开待合并的图像
三张不同颜⾊的荧光图像
2、合并不同颜⾊通道（Image-Color-Merge Channels）
企业管理规章制度弹出Merge Channels界⾯：
总共有7个颜⾊通道，每个颜⾊选择对应的照⽚，点击OK。出现合并后的图像（Composite）。
但这时候的合并图像只是三个8-bit的Stacks，如果要保存的话需要把图像转换为RGB模式。
测控技术与仪器专业左右调节⼯具条，发现左上⾓的颜⾊信息会变，但是图⽚依然是合并后图像
Tips：如果想要更改某⼀颜⾊通道，可以使⽤Channels Tool（Image-Color-Channels Tool），选择不同通道后，对单⼀通道进⾏修改，不影响其他通道。
选择不同Channel，可以呈现不同颜⾊
3、⽣成RGB的合并图像（Image-Color-Stack to RGB）
⽣成⼀张命名为Composite的RGB图像：
命名为Composite的RGB图像
注意：这⾥⼀定要Stack to RGB，否则保存后的图⽚并不是Merge后的状态。
4、保存图⽚（File-Save）
（2）分割如何去国外留学
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1、打开⼀张RGB图像
2、将RGB图像转换为Composite图像（Image-Color-Make Composite）
这时候三种颜⾊通道都已经分离出来了。这⼀步是为了后⾯能直接分割出三个带有伪彩的通道。如果直接Split
Channels，也会得到三个通道，但是没有伪彩。
（3）分离不同颜⾊通道的图⽚（Image-Color-Split Channels）
（4）分别保存图像（File-Save）
⼆、荧光与明场之间合并
做siRNA、慢病毒等转染实验时，需要统计细胞的转染效率。同⼀视野下，分别拍摄荧光和明场的照⽚，这时候就需要将荧光和明场照⽚合并，易于计算带有荧光标记的细胞。
1、打开荧光和明场图像
2、合并不同颜⾊通道（Image-Color-Merge Channels）
与荧光照⽚合并的唯⼀不同是：明场照⽚选择gray通道：
Tips：如果荧光较弱，可以单独对荧光照⽚增加亮度和对⽐度（Image -> Adjust -> Brightness/Contrast）。
3、⽣成RGB的合并图像（Image-Color-Stack to RGB）
4、保存图⽚（File-Save）
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