呼吸道标本热灭活处理对SARS-CoV-2核酸检测结果的影响
第46卷第2期2020年4月
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兰州大学学报(医学版)
十大名牌电动车排名Journal of Lanzhou University(Medical Sciences)
Vol.46 No.2
电大毕业自我鉴定Apr.2020
文章编号:1000-2812 (2020)02-0106-04
呼吸道标本热灭活处理对SARS-CoV-2 核酸检测结果的影响
魏喜生a,周萍%刘才周%周伟a,何强%
杨彦麟a,李俊峰a,b,肖萍3
兰州大学第一医院a传染病研究室,b感染科甘肃兰州730000
关键词:新型冠状病毒;核酸;逆转录一聚合酶链反应;灭活
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中图分类号:R593.22文献标识码:A doi :i0.13885/j.issn. 1000-2812.2020.02.020
新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019, C O V I D-19)的诊断依赖于流行病学史、临床表现和实验室检查,其中呼吸道标本的新型冠状病毒(S A R S-C o V-2)核酸检测在实验室诊 断中起重要作用由于标本的强传染性,对实 验人员的安全防护造成较大挑战,可靠且不影响 检测结果的标本病毒灭活方法,减少实验室感染 显得非常重要。相关研究提示中东呼吸综合征冠 状病毒56 °C灭活大约25 m i n能明显降低病毒载 量[31,将血样热灭活后血清学检测是一种常用的 实验室方法,有研究提示[—5]将血浆经56 °C热灭 活30 m i n后进行不同感染性抗体检测,结果不尽 相同。因此,传染性标本的灭活处理对于检测结 果的影响可能与病原种类及检测项目有关,目前 基于对其他冠状病毒理化特性的研究,56 °C加热 30 m i n可有效灭活S A R S-C o V-2病毒161,但是该灭 活方案对病毒核酸检测结果的影响还不清楚。
本研究利用C O V I D-19确诊患者的痰液和咽 拭子呼吸道标本,采用热灭活处理方法,检测分 析不同靶点的核酸水平变化,主要目的是了解灭 活呼吸道标本病毒的方法对病毒核酸检测结果的 影响,为实验室病毒灭活处理后S A R S-C o V-2核 酸结果的变化提供证据支持。1材料
1.1研究标本
研究标本来自于兰州大学第一医院救治的2 例确诊C O V I D-19患者的咽拭子和痰液的呼吸道 标本。
患者具有明确的流行病学史和临床表现,胸部影像学具有肺部感染特征,C O V I D-19的诊 断程序按照文献[2]进行,临床分型均为普通型。本研究通过兰州大学第一医院伦理委员会批准(L D Y Y L L2020-24)。
1.2试剂与仪器
S A R S-C o V-2核酸提取试剂为天根(天根生 化科技(北京)有限公司),扩增试剂由达安基因 (中山大学达安基因股份有限公司)提供。S A R S-C o V-2核酸检测采用实时荧光定量P C R方法在 LightCycler480 (瑞士罗氏公司)仪器上完成。
2 方法
2.1标本处理
高考前的祝福语简短呼吸道检测标本分为灭活组和未灭活组。灭 活组标本全部采用56 °C水浴30 m i n的病毒灭活 方式处理标本,未灭活组标本未做任何特殊处理。
2.2病毒核酸提取
严格按照提取试剂说明书,在n级生物安全
货腰
收稿日期:2020-03-16
基金项目:甘肃省新型冠状病毒肺炎科技重大专项
作者简介:魏喜生,男,主管检验师,研究方向为传染病基因诊断,e-mai丨:406146239@q q.c o m;
肖萍,女,主任医师,研究方向为肝病及传染病的基础和临床,e-mail: x p l689@s i n a.c o m,通信联系人

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