2022年临床基因扩增检验技术人员上岗证考试题含答案
2022年临床基因扩增检验技术人员上岗证考试题含答案
一、单项选择题
L在临床基因扩增检验中，弱阳性室内质控品发生失控，常见的原因有下述各项，但除外A核酸提取中的丧失.有机溶剂的去除不彻底标本中扩增抑制物的残留等
B扩增仪孔间温度的不均一性
C.Taq酶和/或反转录酶的失活
D扩增产物的污染
2新冠病毒核酸检测过程中为最大限度监控实验室假阳性结果，阴性室内质控建议
A.建议每批检测设立1个阴性质控
B.建议每批检测设立2个阴性质控，二份阴性质控固定
C.建议每批检测设立3个阴性质控，三份阴性质控固定
D.建议每批检测设立3个阴性质控，三份阴性质控随机放在临床样本中间。与待测样本同时参与全过程检测
3.PCR扩增检测采用内标，可以识别扩增检测的
A.假阴性
B.假阳性
C.假阴性.假阳性都可以预防
D.假阴性，假阳性都不能预防
4.核酸探针的标志性特征是
A.一小段序列的单链核酸
B.一小段未知序列的单链核酸
C.一小段未知序列的双链核酸
D.有同位素或非同位素标志物
5，使用PCR技术检测新冠病毒核酸时，PCR体系所必需的组分是：
①模板②引物③四种脱氧核甘酸④DNA聚合酶⑤16SRNA⑥反转录酶
A.①②3④⑤
B.②3④56
C.①②346
D.①3④56
6.UNG防止污染可以预防由下述引起的污染A.PCR产物
B.原始靶核酸
C.标本间交叉污染
D.其它污染.分子诊断定量检测工程室内质控如出现以下哪种失控规那么可考虑为随机误差
A.4(1S)
B.2(2S)
C.R(4S)
D.7(T)
7.在一个DNA分子中，如G所占摩尔比为17.2%，那么A所占摩尔比为A.82.8%
B.32.8%
C.17.2%
D.65.6%.生物平安水平的级别共分为几个等级
A.1个
B.2个
C.3个
D.4个
基因突变的实质是指A.染体上的DNA序列变化了
B.染体上的DNA变成了蛋白质
C.染体上的DNA变成了 RNA
D.染体上的DNA高级结构发生了局部改变.如果一个PCR反响体系中加入模板200个，经过30个循环后，理论上扩增产物的数
量将到达A.200X30x2
B.200(2)x30
C.200x2（30）
D.200x20（2）.荧光定量PCR检测过程中，基线漂移的可能原因有
A.蒸发
B.探针水解
C.相邻荧光通道干扰
D.以上都是
13似下哪些有利于DNA的保存A.加入EDTA整合钙离子，去除核酸酶的活性
B.加入少量DNase
C.溶于pH3.0的溶液中
D.加入少量RNase.核酸分子中储存遗传信息的关键局部是
A.mRNA
B.tRNA
C.rRNA
D.DNA
14.新冠病毒核酸检测样本送检A.样本采集后室温放置不超过4h
B.应按照《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》（原卫生部令第45号）办理《准运证书》
C.样本应单独转运，不能和其他物品混杂
D.以上都对
26.实时荧光RT-PCR检测新型冠状病毒2个靶标（ORF1AB和N基因），阳性结果判断错误的选项是
A.同一份标本中检测结果均为阳性，判定为阳性
B.同一份标本单个靶标阳性后对该样本重复
检测。如果仍为单靶标阳性，判定为阳性
C.两种标本同时出现单靶标阳性，可判定为阳性
D.同种类型标本两次采样检测中均出现单个靶标阳性的检测结果，可判定为阳性
二、填空题.普通临床基因扩增检验实验室一般包括下面四个分区：试剂储存和准备区，标本制备区，扩增区，扩增产物分析区。
1.临床基因扩增检验实验室检测用的试剂应当国家食品和药品监督局批准。
2.PCR污染的主要污染源有标本间交叉污染和PCR试剂的污染等，预防PCR污染的方法有划定区域和实验流程标准化等。
3.新冠病毒核酸检测假阴性的可能原因：样本质量差，样本收集过早或者过晚，没有正确的保存运输处理.，技术问题，试剂问题。
4.PCR扩增结果的影响因素有引物，模板，DNA聚合酶和dNTP，反转录酶.分子诊断设备管理重点关注设备标识、设备档案、设备校准、设备保养和设备报废.
5.针对常规分子诊断定性检测试剂不同批号性能验证时，应选择阴性和弱阳性的样品.全血标本DNA检测，可2-帆C 下短期保存;RNA检验，那么应-20° C保存长期-70° C
三，判断题（每题2分，共20分）L根据目前掌握的新型冠状病毒生物学特点、流行病学特征、致病性、临床表现等信息，该病原体暂按照病原微生物危害程度分类中第二类病原微生物进行管理。对错
2.未经培养的感染性材料在采用可靠的方法灭活前进行的新型冠状病毒核酸提取, 可以在生物平安一级实验室进行。
对错
3.未经培养的感染性材料在采用可靠的方法灭活前进行的新型冠状病毒核酸提取, 实验人员应采用生物平安三级实验室的个人防护。
对错
4，应当由经过适当培训的人员使用适当的个人防护装备和设备处理新型冠状病毒危险废弃物。
对.定量PCR与定性PCR测定原理最主要的区别在于前者的测定点在PCR的指数扩增期，而后者多为扩增平台期。
对错
5.实验室检测工程无法参加室间质量评价计划时，可以用室内质控替代。
对错
6.NGS技术检测结果具有很高的准确性，不需要进行性能验证或性能确认。
对错
8，扩增管没有盖好会造成PCR过程中反响液产生热蒸发，直接影响检测结果，但不会成为一个污染源。
对错
9.使用NGS技术可实现对临床样本中包括点突变（SNV）、插入缺失（Indel）、拷贝数变
异（CNV）和结构变异（SV）等多种变异的识别。
对错
10.肿瘤组织FFPE样本进行核酸检测前应由病理医师在显微镜下确认肿瘤细胞性质和含量。
对借
四、问答题L实验室检测人员在进行PCR操作时应注意哪些关键点？
1、戴一次性手套，假设不小心溅上反响液，应立即更换手套。
2、防止反响液飞溅, 假设不小心溅到手套或桌面上，应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面。
3、使用一次性吸头，严禁与PCR产物分析室的吸头混用，吸头不要长时间暴露于空气中防止空气中气溶胶的污染。
4、操作多份样品时，制备反响混合液，先将dNTP、缓冲液、引物和酶混合好，然后再分装这样既可以减少操作次数，防止污染，又可以增加反响的精确度。
5、最后加入反响模板，加入后盖紧反响管。
6、操作时设立空白对照和阴阳性对照，既可验证PCR反响的可靠性，又可以协助判断扩增系统的可信性。
7、由于实际操作时加样器很容易受产物气溶胶或标本DNA的污染，所以操作者最好使用高压处理过的或可替换的加样器。假如没有这种特殊的加样器，至少在PCR操作过程中加样器应该专用，严禁交叉使用，尤其是PCR产物分析所用加样器不能拿到其它两个相邻区域使用。
8、重复实验，验证结果，慎下结论。
2、感染性疾病的定量、定性检测，人基因组的基因型检测，对上述三类PCR检测的室内控品浓度水平和型别如何要求？
定量测定：2个浓度质控品+ 1个阴性注意低值浓度质控品的选择与检测下限的关系。
定性测定：1个阴性+ 1个弱阳性和/或阳性质控品。
人基因组：1个野生型+ 1个突变型。
3、有一实验室准备使用ARMS法开展肿瘤EGFR基因突变检测，是否需要做性能验证？如要做，至少需作哪些参数？该如何做？该如何做？需要做性能验证。
L精密度2.方法符合率3.检出限L精密度：包括重复性和中间精密度。重复性对样本进行至少10次重复测定，阴阳性符合率290%，中间精密度每天检测3到4次，连续检测5天，阴阳性符合率大于等于90%o
2.方法符合率：通过与参比方法进行比拟。阴性样本5例，阳性包括弱阳性/低扩增不少10例。
3.检出限：样本是定值标准物质，验证方法：定值标准物质样本梯度稀释至厂家声明的检出限浓度。重复测定5次或不同批内重复测定20次。判断，5次重复检测必须100%检出靶核酸，20检测必须至少18次检出靶核酸。
4•简述新冠病毒核酸检测中如何进行实验室清洁？
L实验室空气：实验室每次检测完毕，应进行紫外消毒至少30分钟。
2.工作台面、地面：每天试验后使用0.5%〜1%有效氯消毒液进行台面、地面消毒。垃圾桶及垃圾袋应喷洒0.5%〜1%有效氯的消毒液。
3，生物平安柜：每天试验后用75%乙醇对生物平安柜进行擦拭。上岗证在哪办
4，转运容器：转运及存放标本的容器使用前后用75%乙醇进行擦拭和喷洒消毒。
5，核酸提取仪：每天实验后紫外消毒至少30分钟，用75%乙醇对核酸提取仪进行擦拭。

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